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HPLC色譜柱汙染問題及實用對策!

返回列表 來源: 發布日期: 2020.10.11
保留時間(jiān)漂移的另一個常見原因是色譜柱(zhù)汙染。HPLC色(sè)譜柱是非常有效的(de)吸附性過濾器,它可(kě)以(yǐ)過濾並吸附流(liú)動相攜帶的任何物質。汙染源可以是:流動相本身,流動相容器,連接管、泵、進(jìn)樣器和儀器密封墊(diàn),以(yǐ)及樣品等。通常通過實驗可判斷汙染的來源。
樣品中(zhōng)如果存在色譜柱上保留很強的(de)組分,就可 能是使(shǐ)保留時間漂移的(de)潛在根源。這些(xiē)根源通常是樣品(pǐn)基質。避免色譜(pǔ)柱汙染最簡單的方法是防患於未然(rán)。通常使用在給定色譜條件下的強溶劑,但並非所有汙染物都可以在流動相中溶解。使用保護柱(zhù)是個非常有效的方法。反衝色譜柱僅是不得已時采用的辦法。
流動相組成
流動相組成的緩慢變化也是保留時間漂移的(de)常見原因。如流動相中易揮發組分的揮發及循環使(shǐ)用流動相等(děng)。
疏水(shuǐ)坍塌  

當小孔徑(jìng)、端基封口良好的反相填料色譜(pǔ)柱(zhù)使用接近100%的水為流動相時(shí),有時會發生分離突然喪失及被分析物質保留明顯降低或完全不保留的現象,這就是疏水坍塌。此現象是(shì)由流動相不浸潤(rùn)固定相表麵而致。挽救的辦法實現用含大量有機組分(fèn)的(de)流動相浸潤固定(dìng)相,再用高水含(hán)量的流動相進行平衡(héng)。色譜柱長期儲存也(yě)會發生此現(xiàn)象。使用內嵌極性基團的反相色譜柱(如Waters  SymmetryShield RP色譜柱) 或非端(duān)基封口的色譜(pǔ)柱(zhù)(如Waters  Resolve色譜柱)也可(kě)避免發生坍塌。

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